筑起機體免疫長(cháng)城

一、原理
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法定量檢測樣品中克倫特羅的殘留量。
二、適用范圍
定量檢測動(dòng)物組織、飼料、尿液、血清樣品中克倫特羅藥物的殘留。
三、試劑盒特點(diǎn)及技術(shù)指標
 * 檢 測 時(shí) 間 ： 30 min
  試劑盒靈敏度： 0.1 ppb(µg/kg)
 * 試劑盒檢測純陰性樣本的背景值＜0.2 ppb
 * 尿液樣品直接點(diǎn)板，假陽(yáng)性率≤1 %
   試劑盒檢測樣本的靈敏度和準確度： 四、所需材料
儀器：微孔板酶標儀450 nm/630 nm、均質(zhì)器、振蕩器、離心機、刻度移液管（10 mL）、天平（感量0.01 g）、離心管（5 mL, 50 mL）
微量移液器：?jiǎn)蔚?nbsp;1 µL～10 µL、10 µL～100 µL
多道 50 µL～300 µL
試劑：甲醇、濃鹽酸、氫氧化鈉、去離子水。
五、 試劑盒組成
*注：6個(gè)標準品濃度為：0 ppb, 0.1 ppb, 0.3 ppb,
0.9 ppb, 2.7 ppb, 8.1 ppb，直接使用。
六、 酶標免疫測定程序
①     將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出，待其完全回  升至室溫（20～25℃）后方可使用。注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
②  按標準品和樣品雙孔平行的數量使用微孔。
③  加標準品/樣品、抗體：加標準品/樣品50 µL
到對應的微孔中，加入克倫特羅酶標物50 µL /孔，再加入克倫特羅抗體50 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應20 min。
④  洗板：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內液體甩干，
加入洗滌工作液250 µL/孔，每次靜置20 s，甩去孔內液體，重復洗滌3次，最后一次用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破）。
⑤  顯色：加入底物液A液50 µL/孔，再加底物   
液B液50 µL/孔，輕輕振蕩混勻，用蓋板膜蓋板后置37℃避光環(huán)境中反應10 min，最后一次用吸水紙拍干。
⑥     測定：加入終止液50 µL/孔，用酶標儀立即  測定450 nm處的吸光度值（建議用雙波長(cháng)450/630 nm）檢測。
七、 結果判定
以標準品百分吸光率為縱坐標，以克倫特羅標準品濃度（ppb）的半對數為橫坐標，繪制標準曲線(xiàn)圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線(xiàn)中，從標準曲線(xiàn)上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中克倫特羅實(shí)際濃度。（詳見(jiàn)試劑盒專(zhuān)業(yè)分析軟件，以便進(jìn)行大量樣本的分析計算。）
八、 注意事項
① 洗板拍干后應立即進(jìn)行下一步操作。
② 反應終止液為2M硫酸，避免接觸皮膚。
③ 不使用過(guò)了有效期的試劑盒，不交換使用不同批號的試劑。
④ 0標準的吸光度（450/630 nm）值小于0.5（A450nm<0.5）時(shí)，表示試劑可能變質(zhì)。
⑤ 在加入底物液A液和底物液B液后，一般顯色時(shí)間為15～20 min即可。若顏色較淺，可延長(cháng)反應時(shí)間到30 min，反之則減短反應時(shí)間。
九、貯藏條件及保存期
貯藏條件： 2～8℃
保 質(zhì) 期： 12個(gè)月