筑起機體免疫長(cháng)城

 
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】山羊痘（GTP）是由山羊痘病毒感染山羊引起的一種急性、熱性和高度接觸性傳染病。在山羊痘的免疫預防工作中，接種了山羊痘疫苗后，由于多種因素可能導致羊不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平山羊痘病毒抗體。
本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測羊血清中GTPV抗體，用于免疫山羊痘疫苗后的抗體動(dòng)態(tài)水平監測，指導免疫預防工作，評估羊場(chǎng)山羊痘免疫狀況，也可用于山羊痘的流行病學(xué)調查。
【產(chǎn)品內容】

試劑盒主要成分	數 量
抗原包被板（GTPV）	96T×1
陽(yáng)性對照	1ml×1
陰性對照	1ml×1
酶標結合物	10ml×1
樣品稀釋液	20ml×1
底物液	10ml×1
終止液	7ml×1
濃縮洗滌液（20×）	50ml×1
封口膠	1份
使用說(shuō)明書(shū)	1份

【成分性狀】 

包被板	96孔塑制微孔板，無(wú)色透明，干燥，無(wú)雜質(zhì)吸附
酶標結合物	略帶黃色澄明液體
陰、陽(yáng)性對照	略帶黃色澄明液體
樣品稀釋液	無(wú)色或略帶黃色澄明液體
濃縮洗滌液	無(wú)色或略帶黃色澄明液體
底物液	無(wú)色或微藍色澄明液體
終止液	無(wú)色澄明液體，低溫條件下可能會(huì )出現絮狀沉淀

【用法與判定】 按以下步驟進(jìn)行：
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來(lái)稀釋洗滌液的500 ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備 
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行40倍稀釋(建議：5μl血清樣品加入195μl樣品稀釋液中)，樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。注意：①制備血清用的血液樣本應無(wú)溶血現象發(fā)生；②不能稀釋陰性、陽(yáng)性對照。
3、操作步驟 （﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應恢復至室溫）
3.1  在A(yíng)1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2  在A(yíng)3和A4孔中分別加入100μl陽(yáng)性對照；
3.3  取100μl稀釋好的待檢樣品加入相應孔中，并做好記錄；
3.4  37℃孵育30min；
3.5  將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進(jìn)行稀釋?zhuān)?/em>進(jìn)行洗板，重復5次，每次30s；
*加液時(shí)防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果，盡量將孔內洗滌液拋甩干凈；
3.6  每孔加100μl酶標結合物；
3.7  37℃孵育30min；重復步驟3.5；
3.8  每孔加50μl底物液；
3.9  37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10  每孔加50μl的終止液；
3.11  立刻于450nm波長(cháng)處測定各孔的吸光度值，即OD₄₅₀值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照孔OD₄₅₀值≤0.3；
4.2陽(yáng)性對照：正常情況下，陽(yáng)性對照孔OD₄₅₀值≥0.6；
4.3臨界值(C.O.)計算：臨界值=0.18+陰性對照均值；陰性對照OD₄₅₀值大于0.3時(shí)應舍棄，如所有陰性對照OD₄₅₀值均大于0.3時(shí)須重復實(shí)驗；陰性對照低于0.05時(shí)以0.05計算。
4.4結果判定： 檢測樣品OD₄₅₀值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽(yáng)性； 檢測樣品OD₄₅₀值＜臨界值，判定該檢測樣品為陰性。依據農業(yè)部山羊痘免疫和監測方案，免疫21天后，山羊痘病毒抗體ELISA檢測試驗抗體陽(yáng)性判定為免疫合格。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數量過(guò)多時(shí)，應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統一將血清樣品加入酶標板中，使反應時(shí)間一致。
（2）試劑盒使用的過(guò)程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應在2～8℃存放；使用前恢復到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過(guò)有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過(guò)程中的移液、時(shí)間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×1
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月
【聯(lián)系人】 王金良                                   電話(huà)：0543-3403060
僅供獸醫診斷使用