羊偽狂犬病毒IgG抗體ELISA檢測試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
更新時(shí)間：2019-06-15 瀏覽量：
【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
羊偽狂犬?。≒R）是一種高度接觸性、急性傳染病，給國內養豬業(yè)造成巨大的損失。在豬偽狂犬的免疫預防工作中，接種了豬偽狂犬疫苗后，由于多種因素可能導致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平豬偽狂犬病毒抗體。
gb蛋白是PRV結構蛋白，是PRV的主要保護性抗原蛋白，可誘導機體產(chǎn)生保護性抗體。本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測豬血清中抗PRV gD蛋白抗體IgG。用于免疫偽狂犬疫苗后的抗體動(dòng)態(tài)水平監測，指導免疫預防工作，評估偽狂犬免疫狀況，也可用于豬偽狂犬的流行病學(xué)調查。
【產(chǎn)品內容】
【成分性狀】
【用法與判定】 按以下步驟進(jìn)行：
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來(lái)稀釋洗滌液的500 ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行100倍稀釋(建議：2μl血清樣品加入198μl樣品稀釋液中)，樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。
注意：①制備血清用的血液樣本應無(wú)溶血現象發(fā)生；②不能稀釋陰性、陽(yáng)性對照。
3、操作步驟 （﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應平衡至室溫）
3.1 在A(yíng)1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2 在A(yíng)3和A4孔中分別加入100μl陽(yáng)性對照；
3.3 取100μl經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品加入相應孔中，并做好記錄；
3.4 37℃孵育30min；
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進(jìn)行稀釋?zhuān)?/em>進(jìn)行洗板，重復5次，每次30s；
﹡加液時(shí)防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果，盡量將孔內洗滌液拋甩干凈；
3.6 每孔加100μl酶標結合物；
3.7 37℃孵育30min；重復步驟3.5；
3.9 每孔加100μl底物液；
3.9 37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10 每孔加100μl的終止液；
3.11 立刻于450nm波長(cháng)處測定各孔的吸光度值，即OD450值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照OD450值≤0.2；
4.2陽(yáng)性對照：正常情況下，陽(yáng)性對照OD450值≥0.4；
4.3臨界值(C.O.)的計算：臨界值=0.18+陰性對照均值；陰性對照OD450值大于0.2時(shí)應舍棄，如所有陰性對照OD450值都大于0.2時(shí)須重復實(shí)驗；陰性對照于0.05時(shí)以0.05計算。
4.4結果判定：檢測樣品OD450值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽(yáng)性；檢測樣品OD450值＜臨界值，判定該檢測樣品為陰性。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數量過(guò)多時(shí)，應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統一將血清樣品加入酶標板中，使反應時(shí)間一致。
（2）試劑盒使用的過(guò)程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應在2～8℃存放；使用前恢復到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過(guò)有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過(guò)程中的移液、時(shí)間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月
【聯(lián)系人】 王金良 電話(huà)：0543-3403060
羊偽狂犬?。≒R）是一種高度接觸性、急性傳染病，給國內養豬業(yè)造成巨大的損失。在豬偽狂犬的免疫預防工作中，接種了豬偽狂犬疫苗后，由于多種因素可能導致豬不產(chǎn)生或產(chǎn)生低水平豬偽狂犬病毒抗體。
gb蛋白是PRV結構蛋白，是PRV的主要保護性抗原蛋白，可誘導機體產(chǎn)生保護性抗體。本試劑盒采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測豬血清中抗PRV gD蛋白抗體IgG。用于免疫偽狂犬疫苗后的抗體動(dòng)態(tài)水平監測，指導免疫預防工作，評估偽狂犬免疫狀況，也可用于豬偽狂犬的流行病學(xué)調查。
【產(chǎn)品內容】
| 試劑盒主要成分 | 數 量 |
| 包被板 | 96T×2 |
| 陽(yáng)性對照 | 1ml×1 |
| 陰性對照 | 1ml×1 |
| 酶標結合物 | 20ml×1 |
| 樣品稀釋液 | 50ml×1 |
| 底物液 | 20ml×1 |
| 終止液 | 15ml×1 |
| 20×濃縮洗滌液 | 50ml×1 |
| 封口膠 | 2份 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 |
| 包被板 | 96孔塑制微孔板，無(wú)色透明，干燥，無(wú)雜質(zhì)吸附 |
| 酶標結合物 | 略帶黃色澄明液體 |
| 陰、陽(yáng)性對照 | 略帶黃色澄明液體 |
| 樣品稀釋液 | 無(wú)色或略帶黃色澄明液體 |
| 濃縮洗滌液 | 無(wú)色或略帶黃色澄明液體 |
| 底物液 | 無(wú)色或微藍色澄明液體 |
| 終止液 | 無(wú)色澄明液體，低溫條件下可能會(huì )出現絮狀沉淀 |
1、需要自備的器材
1.1 微量移液器；
1.2 微量移液器配套使用的槍頭；
1.3 用來(lái)稀釋洗滌液的500 ml量筒；
1.4 適用于檢測96T微孔板的酶標儀；
1.5 用于稀釋樣品的1.5 ml Ep管；
1.6 蒸餾水或去離子水。
2、樣品的制備
用樣品稀釋液將待檢血清樣品進(jìn)行100倍稀釋(建議：2μl血清樣品加入198μl樣品稀釋液中)，樣品加入包被板前要充分混勻，稀釋不同待檢樣品注意更換槍頭。
注意：①制備血清用的血液樣本應無(wú)溶血現象發(fā)生；②不能稀釋陰性、陽(yáng)性對照。
3、操作步驟 （﹡使用前應輕輕旋轉或震蕩予以混勻，所有試劑應平衡至室溫）
3.1 在A(yíng)1和A2孔中分別加入100μl陰性對照；
3.2 在A(yíng)3和A4孔中分別加入100μl陽(yáng)性對照；
3.3 取100μl經(jīng)1:100稀釋好的待檢樣品加入相應孔中，并做好記錄；
3.4 37℃孵育30min；
3.5 將各孔的液體棄入廢液桶，每孔加250μl的洗滌液（試劑盒內20×濃縮洗滌液需用蒸餾水或去離子水稀釋后方可使用。如有結晶，需先溶解后，方可進(jìn)行稀釋?zhuān)?/em>進(jìn)行洗板，重復5次，每次30s；
﹡加液時(shí)防止各孔間洗滌液串流影響檢測結果，盡量將孔內洗滌液拋甩干凈；
3.6 每孔加100μl酶標結合物；
3.7 37℃孵育30min；重復步驟3.5；
3.9 每孔加100μl底物液；
3.9 37℃孵育10min（避光顯色）；
3.10 每孔加100μl的終止液；
3.11 立刻于450nm波長(cháng)處測定各孔的吸光度值，即OD450值。
4、試驗有效性判斷
4.1陰性對照：正常情況下，陰性對照OD450值≤0.2；
4.2陽(yáng)性對照：正常情況下，陽(yáng)性對照OD450值≥0.4；
4.3臨界值(C.O.)的計算：臨界值=0.18+陰性對照均值；陰性對照OD450值大于0.2時(shí)應舍棄，如所有陰性對照OD450值都大于0.2時(shí)須重復實(shí)驗；陰性對照于0.05時(shí)以0.05計算。
4.4結果判定：檢測樣品OD450值≥臨界值，判定該檢測樣品為陽(yáng)性；檢測樣品OD450值＜臨界值，判定該檢測樣品為陰性。
【注意事項】
（1）待檢血清樣品數量過(guò)多時(shí)，應先使用血清稀釋板將所有待檢血清稀釋完畢后，再統一將血清樣品加入酶標板中，使反應時(shí)間一致。
（2）試劑盒使用的過(guò)程中不要吸煙、喝水和吃東西。
（3）底物液和終止液對皮膚有刺激性，注意防護。
（4）底物液不要暴露于強光和任何氧化劑；使用潔凈的玻璃和朔料容器處理底物液。
（5）所有試劑應在2～8℃存放；使用前恢復到室溫，使用后放回2～8℃。
（6）注意防止試劑盒組分受到污染。
（7）不要使用超過(guò)有效期的試劑，不同批次試劑盒的組分不要混用。
（8）操作過(guò)程中的移液、時(shí)間和洗滌必須精確。
【規格與包裝】96T×2
【貯藏與有效期】2～8℃避光保存，有效期為12個(gè)月
【聯(lián)系人】 王金良 電話(huà)：0543-3403060
僅供獸醫診斷使用
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編輯：熊方方
